植物葉綠素的測定方法以及步驟

來源： http://www.siela.cn/ 　類別：技術文章　更新時間：2013-12-03　閱讀次

植物葉綠素的測定方法以及步驟
葉綠素是一類與光合作用（photosynthesis）有關的最重要的色素。光合作用是通過合成一些有機化合物將光能轉變為化學能的過程。葉綠素實際上存在于所有能營造光合作用的生物體，包括綠色植物、原核的藍綠藻（藍菌）和真核的藻類。葉綠素從光中吸收能量，然后能量被用來將二氧化碳轉變為碳水化合物。
    植物葉綠素的測定方法：
   （1）材料：新鮮（或烘干）的植物葉片。
   （2）儀器設備：1）分光光度計；2）電子頂載天平（感量0.01g）；3）研缽；4）棕色容量瓶； 5）小漏斗；6）定量濾紙；7）吸水紙； 8）擦境紙；9）滴管。
   （3）試劑：1）95%乙醇（或80%丙酮）（v丙酮：v乙醇=2：1的95%水溶液）；2）石英砂；3）碳酸鈣粉。暗中2h，0.5g，25ml
   （4）取新鮮植物葉片（或其它綠色組織）或干材料，擦凈組織表面污物，剪碎（去掉中脈），混勻。
   （5）稱取剪碎的新鮮樣品0.2g，共3份，分別放入研缽中，加少量石英砂和碳酸鈣粉及2～3ml 95%乙醇，研成均漿，再加乙醇10ml，繼續研磨至組織變白。靜置3～5min。
   （6）取濾紙1張，置漏斗中，用乙醇濕潤，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，過濾到25ml棕色容量瓶中，用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘渣數次，最后連同殘渣一起倒入漏斗中。
   （7）用滴管吸取乙醇，將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘渣中無綠色為止。最后用乙醇定容至25ml，搖勻。
   （8）把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內，以95%乙醇為空白，在波長663nm和645nm下測定吸光度。