馬尾杉孢子的形態特征觀察

來源： http://www.siela.cn/ 　類別：技術文章　更新時間：2013-03-22　閱讀次

粗糙馬尾杉為石杉科馬尾杉屬擬石杉組植物，又名杉葉石杉，是我國馬尾杉屬體型最大的種。民間主要用于治療腦癱，與同科植物蛇足石杉的藥用功能相近，推測其可能與蛇足石杉有相同的有效成分石杉堿甲。為尋找蛇足石杉的替代植物，擴大石杉堿甲的藥源來源，有必要對粗糙馬尾杉展開相關研究。孢子形態對植物的分類、系統發育及有效成分的形成均有重要的意義。本文利用光鏡、掃描電鏡和透射電鏡相結合，對粗糙馬尾杉的孢子的形態及孢壁的形成進行了研究，探討了粗糙馬尾杉孢子外壁的來源和形成方式，為同科植物蛇足石杉的系統學、孢粉學及孢子繁殖研究提供參考。
　　馬尾杉孢子為用定量風流孢子捕捉器捕捉于廣西百色靖西縣，經廣西中醫學院劉壽養教授鑒定為石杉科擬石杉組粗糙馬尾杉。光鏡觀察：將孢子囊從植株上剝離下來，用蒸餾水反復沖洗，制水封片前將孢子囊刺破，使孢子散發在載玻片上，去除孢子囊后蓋上蓋玻片，用光學顯微鏡觀察照相。掃描電鏡觀察：將孢子囊清洗后，用40%戊二醛固定，用0.1mol/L磷酸緩沖液漂洗，再用20%鋨酸固定1h。經PBS漂洗后梯度脫水，醋酸異酯過渡，CO2臨界點干燥，用鑷子將孢子囊刺破，使孢子粘在銅臺上，噴金后在電鏡下掃描，拍照并記錄。選擇20個孢子測量其極軸長和赤道軸長，并觀察孢子表面紋飾及裂縫形態。透射電鏡觀察：將孢子用1%鋨酸水溶液在室溫黑暗條件下進行后固定過夜，用0.1mol/L磷酸緩沖液漂洗，經丙酮逐級脫水后，樹脂滲透液中逐級滲透，純包埋劑中包埋，烘箱中聚合，切片，經鉛鈾染色后用HitachiIH-7650型透射電子顯微鏡觀察照相。
　　經過觀察發現：孢子的顯微特征孢子囊壁為2～3列細胞組成，為厚囊壁，內有許多孢子，多呈類圓形、扇形。孢子的電鏡掃描特征孢子四面體型，輻射對稱，三裂縫，突起，長度為14.29～17.14μm，約為孢子半徑的5/6，孢子大小為(10.71～12.25)×(18.42～19.57)μm，外壁光滑，孔穴紋飾，極面觀為近圓形，極軸長約10.71～12.25μm，赤道面觀扇形或半圓形，赤道軸長18.42～19.57μm;近極面具淺圓凹狀四分體痕，較小而密集;遠極面具孔穴，穴徑約0.3～0.5μm，較小而均勻，深凹，外壁光滑，偶見烏氏體顆粒，單位面積孔穴數20個，中間一圓形區域無或較少孔穴，孔穴與四分體痕界限明顯，輻射區無孔穴。
　　石杉科植物的孢子壁通常可分為2層，即孢子外壁和孢子內壁，本文對粗糙馬尾杉孢子形態及孢壁各層進行了研究，表明粗糙馬尾杉的孢子外壁是由兩層構成的，外壁內層較厚，由球形的孢粉素沉積形成。外壁外層較薄，是由不定型的孢粉素構成。