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種子DNA提取儀用于大麥干種子的性狀檢測

來源： http://www.siela.cn 　類別：技術文章　更新時間：2014-11-22　閱讀次

      不管是在農業還是林業中對于種子植物的研究中植物的遺傳特性研究是一個重要的課題，自然遺傳性質的研究離不開種子DNA提取儀對DNA的提取進行排列和成分組成的差異。植物中的DNA的提取基本上采用的是植物組織特別是葉片中的，也真因如此種子中的研究變得越來越受到學者的重視。種子DNA提取儀器法提取大麥種子中的DNA可以為提取提供一定的參考依據。
　　
     種子DNA提取儀從干種子中提取的DNA用濃度1%瓊脂糖電泳檢測,DNA是完整的,而且RNA基本無殘留,說明干種子用該方法提取DNA的效果好。試驗用無胚的半粒大麥種子提取DNA,通過與葉片中提取的DNA比較,結果顯示,從干種子中提取DNA與葉片中提取的片段大小相同,因此,從大麥干種子中提取DNA是可靠的。此外,還可用有胚的半粒種子用于形態學觀察,既對DNA進行了檢測,又對大麥的表型性狀進行了檢測。
　　
      將材料除去種皮,并將種子從中間橫向切開。如需要繼續使用有胚乳的部分進行形態學觀察,則切種子的時不能損傷胚乳。將去皮的不含胚的半粒種子(30~50mg)用鉗子夾碎放入2.0ml離心管中,加入液氮,用電鉆(玻璃鉆頭)迅速研磨成白色粉狀(由于樣品量小,不能放在研缽中研磨,否則不能完全收集),進行操作或置于-80℃中用于種子DNA提取儀的提取備用。
　　
       通過種子DNA提取儀的樣品提取研究分析大麥干種子中的蛋白質、糖及RNA含量較高,如果大分子等物質去除不完全,則DNA被這些大分子物質包裹,很難溶于TE中,對后續的研究影響很大。因此,在試驗中,沉淀DAN時,選加入濃度3mol/L醋酸鈉混勻之后再加入異丙醇,這樣,雖然DNA稍有損失,但提純效果好。　　